ISHpalette?短發(fā)夾擴(kuò)增子,簡化原位雜交實驗,開啟高靈敏度檢測新時代!
原位雜交實驗是否令您困擾?
1.傳統(tǒng)方法步驟繁瑣、耗時費力,還可能受到酶處理等復(fù)雜操作的限制。
2.ISHpalette?來拯救你的實驗!
一.優(yōu)勢特點:
1.多重?zé)晒庠浑s交(ISH)技術(shù)
?低背景噪聲,高靈敏度
?優(yōu)異的重現(xiàn)性與定量性
?高品質(zhì)與高性價比
2.卓越的兼容性
?兼容免疫染色與雙重染色
?無需優(yōu)化實驗方案
3.簡單快捷的操作體驗
?無需酶處理,步驟更少,實驗人員均可輕松掌握
?無需添置新設(shè)備
4.提供探針設(shè)計服務(wù)
二.ISHpalette?工作流程
無需特殊設(shè)備或試劑。無需進(jìn)行蛋白酶K通透性處理、乙酰化處理、高溫處理或RNase處理,從而簡化實驗流程,加快染色過程。
三.什么是原位雜交鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(HCR)?
1.基于發(fā)夾DNA的無酶信號放大ISH技術(shù)
通過發(fā)夾結(jié)構(gòu)核酸的自組裝延伸,介導(dǎo)組織切片上標(biāo)記DNA的鏈?zhǔn)椒磻?yīng),從而實現(xiàn)目標(biāo)核酸的可視化檢測。該技術(shù)不依賴抗體或酶促反應(yīng),具有線性信號增強(qiáng)特性和超高信噪比。
2.雙探針精確定位機(jī)制
當(dāng)兩種探針(均含HCR啟動序列)與目標(biāo)結(jié)合后,可觸發(fā)熒光標(biāo)記發(fā)夾DNA的級聯(lián)放大反應(yīng),精準(zhǔn)定位目標(biāo)mRNA,最大限度降低非特異性反應(yīng)。
四.實驗效果
1.單分子級檢測精度
在小鼠腦切片上同步檢測到Vglut2(綠色)、Sik3(紅色)和Vgat(品紅色)mRNA信號,單個mRNA分子以點狀顆粒形式呈現(xiàn)。
2.性能對比
傳統(tǒng)HCR法與ISHpalette?同步檢測小鼠腦切片中Penk(上圖)、Vglut2(中圖)及Nts(下圖)mRNA表達(dá),并進(jìn)行信號強(qiáng)度對比。結(jié)果清晰顯示,采用短發(fā)夾DNA的ISHpalette?具有更優(yōu)的組織滲透性與反應(yīng)活性。所有實驗均未使用蛋白酶K處理。
3.無需酶處理
在小鼠腦切片上,c-Fos蛋白通過免疫染色檢測(左側(cè),綠色),Vglut2 mRNA通過原位HCR檢測(中間,品紅色)。在經(jīng)過蛋白酶K處理的樣本(上排)中,檢測到微弱的c-Fos蛋白信號;而在未經(jīng)處理的樣本(下排)中,蛋白和mRNA均能被清晰地檢測到。
五.適用樣本類型
?石蠟切片
?冰凍切片
?漂浮切片
?貼壁/懸浮細(xì)胞
?全組織樣本
六.訂購信息
Cat | Description |
IPL-G-S23 | ISHpalette? Short hairpin amplifier, SaraFluor?488-S23 (25 slides: 50μL each) |
IPL-G-S45 | ISHpalette? Short hairpin amplifier, SaraFluor?488-S45 (25 slides: 50μL each) |
IPL-R-S41 | ISHpalette? Short hairpin amplifier, ATTO550-S41 (25 slides: 50μL each) |
IPL-R-S73 | ISHpalette? Short hairpin amplifier, ATTO550-S73 (25 slides: 50μL each) |
IPL-B-C-S72 | ISHpalette? Short hairpin amplifier, Cyanine5-S72 (25 slides: 50μL each) |
IPL-B-C-A161 | ISHpalette? Short hairpin amplifier, Cyanine5-A161 (25 slides: 50μL each) |
IPL-CM | ISHpalette? Short hairpin amplifier, custom-made (100 slides: 200μL each) |
IPL-TR-SI | ISHpalette? Short hairpin amplifier, trial set (7 slides: 14μL each) S23/S45/S41/S73/S72/A161 |
IPL-TR-CM | ISHpalette? Short hairpin amplifier, trial set (7 slides: 14μL each) S10/A111/A127 |
IPL-HB | ISHpalette? Hybridization buffer (150 slides: 30 mL) |
IPL-AB | ISHpalette? Amplification buffer (150 slides: 30 mL) |
IPL-DSGN-PB | ISHpalette? Custom design of target probe (1 target) |
IPL-PB-PC-DB | ISHpalette? Design of positive control probe (Gapdh, Hprt, shh, endoglin) |
日本NEPA GENE公司專業(yè)研發(fā)、生產(chǎn)細(xì)胞電轉(zhuǎn)染儀、電融合儀及單細(xì)胞分離提取系統(tǒng)等,其生產(chǎn)NEPA21系列電轉(zhuǎn)染儀、ECFG21高效細(xì)胞電融合與電穿孔儀及PicoPipet單細(xì)胞分離提取系統(tǒng)在研究領(lǐng)域中久負(fù)盛名,已被數(shù)百篇文獻(xiàn)引用,其中不乏高水平雜志的文章,如Nature、Cell、PNAS、Genes & Dvelopment等。